培养基配置技术视频讲解 培养基配置技术视频教程
培养基配制的注意事项有哪些
1、要注意营养成分的用量标准:在配置培养基时要根据配方来精确计算各种营养成份的用量,还要用电子天平称量,并遵循含量由低到高的称量原则,针对含成分量较少的培养基,则需要严格按照比例配成高浓度溶液,并加入所需量的水来进行加热使其完全溶解,才能使细胞的生长速度和效果得到保证。
2、在加热时要不断的搅拌:培亩稿养基在进行加热时要不断进行搅拌,才能避免液体溢出或者发生糊底的情况;而且加热完毕后,注意要等其冷却才能按照配方要求来调整PH值,才能保证最后调至的PH值是与培养基相适应的参数。
3、配置后要规范灭菌:配梁耐散置好的培养基,需要趁热分装至试管或者锥形瓶中,还要注意试管的容量,以免分装时液体上溢而流失营养成份,装完之后,还要用胶塞塞住管口和瓶口,才能达到通气滤菌的效果。同时还要按培养基橡氏配方中规定的条件及时进行规范灭菌,以保证产品的灭菌效果能够达到最好。LB培养基怎么配啊?
LB(Luria-Bertani)培养基是一种常用的细菌培养基,其主要成分包括三种:牛肉提取物、酵母粉和NaCl。LB培养基的配制相对简单,但需要注意一些关键的步骤,以确保培养基的质量和稳定性。下面将详细介绍LB培养基的配制方法和注意事项。
一、LB培养基的配方
LB培养基的配方如下:
牛肉提取物:10克/L
酵母粉:5克/L
NaCl:10克/L
水:1000mL
二、LB培养基的配制步骤
1.称取所需的牛肉提取物、酵母粉和NaCl,加入约500mL的去离子水中,用力搅拌,使其充分溶解。
2.加入足量的去离子水,使总拍局体积达到1000mL。
3.将混合液倒入烧过瓶中,用自动的压力灭菌器进行高压灭菌处理。如果没有自动灭菌器,也可以用压力锅进行灭菌处理。
4.灭菌后,将烧过瓶放置在常温下,待培养基冷却到室温后,可以进行使用或保存。
三、LB培养基的注意事项
1.材料的选择:LB培养基的质量和稳定性与使用的原材料有关。因此,需要选择高质量的牛肉提取物、酵母粉和NaCl,以确保培养基的质量和稳定性。
2.搅拌的时间:在配制过程中,需要充分搅拌混合液,以确保原材料充分溶解。通常需要搅拌10-20分钟,直到混合液变得均匀。
3.灭菌的温度和时间:灭菌是保证培养基质量和稳定性的重要步骤。在灭菌过程中,需要注意灭菌的温度和时间。通常使用高压灭菌器,在121°C下灭菌20-30分钟。如果使用压力锅进行灭菌,神贺简需要在100°C下灭菌30-60分钟。
4.冷却的时间:在灭菌后,需要将烧过瓶放置在室温下冷却到室温后再使用或保存。如果在灭菌后立即使用或保存,可能会影响培养基的质量和稳定性。
5.储存的条件:LB培养基可以在4°C下保存1-2个月,也可以在-20°C下保存6个月以上。在储存过程中,需要注意避免光照和震动,以避免影响培养基的质量和稳定性。
总之,LB培养基游裤是一种常用的细菌培养基,其配制相对简单,但需要注意一些关键的步骤。在配制过程中,需要选择高质量的原材料,充分搅拌混合液,正确进行灭菌,冷却到室温后再使用或保存,以确保培养基的质量和稳定性。求MS培养基的配制步骤,需要详细点的介绍,
激素母液的配制
各种和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1的NaOH溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加定容.一般取100mg配成100ml母液.
2、配制培养基
以配置1LMS培养基为例,按顺序进行如下操作:
1、先在中放入一些蒸馏水.
2、分别取MS中的母液10ml倒入.
3、一般称取30g倒入,搅拌溶解.
4、加蒸馏水用漏斗纯量筒定溶至1L.
5、按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要.所以有条件的话最好销哗用微量可调移液器吸取,减少误差.
6、用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8.(有条件的话使用酸度计,比较精确)可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值.
1当量HCL配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液.
1当量NaOH配制:称取NaOH4g配成100ml溶液.
7、称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化.
8、稍微冷却后,分装入培养容器中.无盖的培养容器要用封口膜或封口,用橡皮筋或绳子扎紧.
9、放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右.
10、灭菌后从灭菌锅中取出返咐培养基,平放在实验台上令其冷却凝固.
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